اهمیت استفاده از DMD SegCheck Kit v1.2 کیت تشخیص دیستروفی عضلانی دوشن
در اکثر کشورها، آزمایش قبل از تولد برای آنیوپلوئیدی‌های کروموزومی در عمل انجام می‌شود. اکثر روش‌های معمول (یعنی سه ماهه اول و دوم سونوگرافی و غربالگری بیوشیمیایی) دارای اشکالاتی هستند زیرا در تشخیص آنیوپلوئیدی‌های کروموزومی، مثبت کاذب یا منفی کاذب وجود دارد. QF-PCR مدتهاست که به یک روش انتخابی برای تشخیص سریع آنیوپلوئیدی‌های رایج کروموزومی تبدیل شده است.
با این حال، تکنیک‌هایی مانند QF-PCR و کاریوتایپ باید توسط متخصصان درخواست شده و بر روی نمونههای انتخابی جنین انجام شود.
زیست فناوری کوثر با آگاهی از این کاستی‌ها، کیت‌های ™SegCheck را تولید کرده است که برای بیش از ۶۰ بیماری این کیت‌ها طراحی شده است و به موجب آن آزمایشگاه‌ها می‌توانند هر بیماری را همراه با غربالگری اولیه آنیوپلوئیدی‌ها به روش QF-PCR بدون نمونه‌برداری و هزینه اضافی تعیین کنند. حتی تست‌های NIPT (آزمایش پیش از تولد غیر تهاجمی) نیز تنها آنیوپلوئیدی را برای نمونه جنین مورد آزمایش قرار می‌دهد.
درصورتی‌که کیت ™SegCheck می‌تواند هم ژن بیماری و هم آنیوپلوئیدی‌ها را برای هر نمونه جنینی که تحت آزمایش تشخیص پیش از تولد قرار دارد، بررسی نماید. در واقع هر کیت ™SegCheck مارکرهای STR خاصی کروموزوم‌های ۱۳، ۱۸، ۲۱ و کروموزوم‌های جنسی همراه با مارکرهای STR خاص بیماری را در خود جای داده است.
مارکرهای STR از تکرارهای ۴ نوکلئوتیدی انتخاب شده‌اند تا تجزیه و تحلیل کمتر صورت گیرد و تفسیر آسان باشد. الل‌های حاصل از این مارکرهای STR می‌توانند در احراز هویت نمونه، رد آلودگی سلول‌های مادر و بسیاری از مزایای دیگر در یک آزمایش کمک کنند. بنابراین، از این مارکرهای کروموزومی می‌توان برای بررسی وجود آنیوپلوئیدی برای کروموزوم‌های آزمایش شده نیز استفاده کرد. در صورت مشکوک بودن به آنیوپلوئیدی، نمونه را می‌توان با مارکرهای بیشتری و با استفاده از روش QF-PCR مانند کیت‌های AneuQuick™ Kit v3.2 یا AneuQuick™ Extra Plus Kit v1.2 انجام داد.
هر آزمایشگاه تشخیص ژنتیک هنگام انجام تشخیص پیش از تولد با مشکلاتی مانند ترکیب نمونه‌ها و آلودگی سلول‌های مادری روبرو می‌شود. این خطاها می‌توانند منجر به تشخیص اشتباه و غربالگری منفی کاذب شوند.
عملکرد کیت DMD SegCheck Kit v1.2 و سایر خانواده SegCheck:
™SegCheck می‌تواند به هر آزمایشگاه ژنتیک پزشکی که تشخیص پیش از تولد دارد، کمک کند. از آنجایی که این کیت‌ها دارای مارکرهایی است که درون یا کنار ژن مختص به بیماری خاص میباشد و تفکیک (segregation) می‌شود، از این مارکرها برای ردیابی الگوی تفکیک و تحلیل پیوستگی ژنی (linkage analysis) می‌توان استفاده نمود. رسم هاپلوتیپ جهت تایید وراثت جهش ژن بیماری در جنین میباشد.
به طور مثال فرض کنید والدین جهش مشابهی داشته باشند و به دلیل تکثیر یک جانبه یا allelic drop out در هنگام تشخیص جهش در جنین به روش مستقیم، هموزیگوت نشان داده می شود که این جهش در رسم هاپلوتیپ و آنالیز آن در یک خانواده نشان می دهد که در واقع هتروزیگوت است که به دلیل ADO، ژن دیگر تقویت نشده است و بدین ترتیب جنین ناقل سقط می شد. دلیل اینکه کیت های ™SegCheck قادر است ADO را تشخیص دهد این است که در هر کیت ™SegCheck بین ۴ تا ۸ مارکر STR وجود دارد و یک نمونه نمی تواند ADO برای همه این مارکرها داشته باشد.
این روش به کار رفته در این کیت‌ها برای اکثر آزمایشگاه‌های ژنتیک پزشکی مولکولی که تشخیص قبل از تولد را انجام می‌دهند، ارزشمند خواهد بود. با این حال، می‌توانند توسط محققان دیگر برای اهداف دیگری مانند تفکیک ژنی یا ارثی یا حتی موزاییسم استفاده شود.
دیستروفی عضلانی دوشن (DMD) شایع‌ترین نوع دیستروفی عضلانی در دوران کودکی است. شیوع آن ۱ از ۳۵۰۰ تا ۵۰۰۰ پسر متولد شده میباشد. نوع خفیف این بیماری دیستروفی عضلانی بکر (BMD) نامیده می‌شود. این بیماری به صورت مغلوب وابسته به جنس به ارث می‌رسد.
بنابراین، بیشتر در مردان دیده می‌شود. ژن مسئول بیماری DMD (Dystrophin) نام دارد که یکی از بزرگترین ژن‌هایی است که 79 اگزون در بازوی کوتاه کروموزوم X دارد. این بیماری عمدتاً در اثر حذف یا کپی ایجاد می‌شود، اگرچه جهش نقطه ای نیز در حدود 30% از موارد مشاهده شده است. این عوامل موجب پیچیده شدن تشخیص می‌گردد.
تشخیص پیش از تولد (PND) برای اختلالات ارثی به یک عمل معمول تبدیل شده است. سالانه میلیون‌ها PND در سراسر جهان انجام می‌شود. تشخیص مولکولی پیش از تولد از اهمیت زیادی برخوردار است زیرا اکثر PND ها با استفاده از این روش‌ها انجام می‌شوند.
PND مستعد تشخیص نادرست به علل مختلف از جمله آلودگی سلول‌های مادر، مخلوط کردن نمونه، نمونه آلوده به نمونههای دیگر، موزاییسم گنادی و غیره است. بنابراین نیازمند روش غیر مستقیمی است که بتواند این تست های مولکولی انجام شده را تایید نماید.
DMD SegCheck™ Kit v1.2 کیت تشخیص مولکولی است که در مدت زمان کوتاهی بیماری DMD و BMD را به همراه اختلالات عددی شایع کروموزومی یا آنیوپلوئیدی در کروموزوم‌های ۱۳، ۱۸، ۲۱، X و تشخیص می‌دهد.
این کیت در اصل بر اساس مارکرهای STR و تکنیک QF-PCR عمل می‌کند تا نمونههای جنین ناقل و یا بیمار را با آنالیز ﺍﺭﺗﺒﺎﻁ ﮊﻧﺘﻴﮑﻲ و پیوستگی ژنی تشخیص دهد. استفاده از نشانگرهای STR باعث می‌شود که تشخیص قبل از تولد دقیقتر و قابل اطمینان‌تر باشد و از تشخیص اشتباه جلوگیری شود.
کیت تشخیصی v1.2 ™SegCheck DMD بر اساس ۱۵ مارکر میباشد که شامل ۶ مارکر STR با هتروزیگوسیتی بالا در ناحیه بالا دست، پایین دست و در داخل ژن DMD و 9 مارکر برای غربالگری اولیه اختلالات شایع کروموزومی (۳ مارکر برای کروموزوم ۲۱، ۲ مارکر برای کروموزوم ۱۸ و ۲ مارکر برای کروموزوم 13) و تعیین جنسیت است.
این کیت بر روی نمونههای DNA تخلیص شده از خون، مایع آمنیون (AF)، نمونه پرز جفتی جنین (CVS) و کارت DBC (کارت نگهدارنده DNA محصول شرکت زیست فناوری کوثر)، بافر لیز کننده خون BLB، بافر لیز کننده سلول های امنیوتیک AFL، و بافر لیز کننده پرز های جفتی CVL قابل استفاده میباشد.
نقد و بررسی‌ها
حذف فیلترهاهنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.