ویژگی های F8 SegCheck Kit v1.2 کیت تشخیص بیماری هموفیلی A

• ردیابی ژن بیماری در شجره نامه
• رفع شبه نمونه جنین با نمونه مادری
• رفع شبه آلودگی نمونه با نمونه دیگر
• تایید اصالت نمونه جنینی و تشخیص خطای جابجایی نمونه
• تعیین جنسیت نمونه
• تعیین هویت نمونه
• غربالگری اولیه آنیوپلوئیدی کروموزومی
• تشخیص و تمیز نمونه های جنین در چند قلوها
• تشخیص دیزومی تک والدی (هترودیزومی یا ایزودیزومی)
• تشخیص پدیده کراسینگ اور در بررسی HLA و ایجاد بیماری
• تشخیص موزاییسم جنین
• موزاییسم گنادی (بیشتر در اختلالات مرتبط با X)
• تایید نتایج تشخیص جهش به روش های مستقیم همچون DNA Sequencing، ARMS، MLPA، Gap PCR و NGS

اهمیت استفاده F8 SegCheck Kit v1.2 کیت تشخیص بیماری هموفیلی A:

در اکثر کشورها، آزمایش قبل از تولد برای آنیوپلوئیدی‌های کروموزومی در عمل انجام می‌شود. اکثر روش‌های معمول (یعنی سه ماهه اول و دوم اولتراسوند و غربالگری بیوشیمیایی) دارای اشکالاتی هستند زیرا در تشخیص آنیوپلوئیدی‌های کروموزومی، مثبت کاذب یا منفی کاذب وجود دارد. QF-PCR مدتهاست که به یک روش انتخابی برای تشخیص سریع آنیوپلوئیدی‌های رایج کروموزومی تبدیل شده است.

با این حال، تکنیک‌هایی مانند QF-PCR و کاریوتایپ باید توسط متخصصان درخواست شده و بر روی نمونه‌های انتخابی جنین انجام شود. زیست فناوری کوثر با آگاهی از این کاستی‌ها، کیت‌های ™SegCheck را تولید کرده است که برای بیش از ۶۰ بیماری این کیت‌ها طراحی شده است و به موجب آن آزمایشگاه‌ها می‌توانند هر بیماری را همراه با غربالگری اولیه آنیوپلوئیدی‌ها به روش QF-PCR بدون نمونه برداری و هزینه اضافی تعیین کنند.

حتی تست‌های NIPT (آزمایش پیش از تولد غیر تهاجمی) نیز تنها آنیوپلوئیدی را برای نمونه جنین مورد آزمایش قرار می‌دهد. در صورتی‌که کیت ™SegCheck می تواند هم ژن بیماری و هم آنیوپلوئیدی‌ها را برای هر نمونه جنینی که تحت آزمایش تشخیص پیش از تولد قرار دارد، بررسی نماید. در واقع هر کیت ™SegCheck مارکرهای STR خاصی کروموزوم های ۱۳، ۱۸، ۲۱ و کروموزوم های جنسی همراه با مارکرهای STR خاص بیماری را در خود جای داده است.

مارکرهای STR از تکرارهای 4 نوکلئوتیدی انتخاب شده‌اند تا تجزیه و تحلیل کمتر صورت گیرد و تفسیر آسان باشد. الل‌های حاصل از این مارکرهای STR می‌توانند در احراز هویت نمونه، رد آلودگی سلول‌های مادر و بسیاری از مزایای دیگر در یک آزمایش کمک کنند. بنابراین، از این مارکرهای کروموزومی می‌توان برای بررسی وجود آنیوپلوئیدی برای کروموزوم های آزمایش شده نیز استفاده کرد. در صورت مشکوک بودن به آنیوپلوئیدی، نمونه را می‌توان با مارکرهای بیشتری و با استفاده از روش QF-PCR مانند کیت‌های AneuQuick™ Kit v3.2 یا AneuQuick™ Extra Plus Kit v1.2 انجام داد.

هر آزمایشگاه تشخیص ژنتیک هنگام انجام تشخیص پیش از تولد با مشکلاتی مانند ترکیب نمونه‌ها و آلودگی سلول‌های مادری روبرو می‌شود. این خطاها می‌توانند منجر به تشخیص اشتباه و غربالگری منفی کاذب شوند.

عملکرد F8 SegCheck Kit v1.2 و سایر کیت های خانواده ™SegCheck :

™SegCheck می‌تواند به هر آزمایشگاه ژنتیک پزشکی که تشخیص پیش از تولد دارد، کمک کند. از آنجایی که این کیت‌ها دارای مارکرهایی است که درون یا کنار ژن مختص به بیماری خاص می‌باشد و تفکیک (segregation) می‌شود، از این مارکرها برای ردیابی الگوی تفکیک و تحلیل پیوستگی ژنی (analysis linkage) می‌توان استفاده نمود. رسم هاپلوتیپ جهت تایید وراثت جهش ژن بیماری در جنین می‌باشد.

به طور مثال فرض کنید والدین جهش مشابهی داشته باشند و به دلیل تکثیر یک جانبه یا allelic drop out در هنگام تشخیص جهش در جنین به روش مستقیم، هموزیگوت نشان داده می‌شود که این جهش در رسم هاپلوتیپ و آنالیز آن در یک خانواده نشان می‌دهد که در واقع هتروزیگوت است که به دلیل ADO، ژن دیگر تقویت نشده است و بدین ترتیب جنین ناقل سقط می‌شد. دلیل اینکه کیت‌های ™SegCheck قادر است ADO را تشخیص دهد این است که در هر کیت ™SegCheck بین ۴ تا ۸ مارکر STR وجود دارد و یک نمونه نمی‌تواند ADO برای همه این مارکرها داشته باشد.

این روش به کار رفته در این کیت‌ها برای اکثر آزمایشگاه‌های ژنتیک پزشکی مولکولی که تشخیص قبل از تولد را انجام می‌دهند، ارزشمند خواهد بود. با این حال، می‌توانند توسط محققان دیگر برای اهداف دیگری مانند تفکیک ژنی یا ارثی یا حتی موزاییسم استفاده شود.

بیماری هموفیلی A و کیت F8 SegCheck Kit v1.2  :

هموفیلی A شایع‌ترین اختلال خونریزی ارثی وابسته به جنس با فراوانی ۱ در ۵۰۰۰ تا ۶۰۰۰ تولد پسر است. این بیماری در اثر جهش در ژن فاکتور ۸ (F8) ایجاد می‌شود که باعث ایجاد نقص در پروتئین فاکتور VIII انعقادی می‌شود. این بیماری بیشتر در مردان دیده می‌شود. سه نوع خفیف، متوسط ​​و شدید این بیماری وجود دارد. موارد جدید گزارش شده بیشتر ناشی از جهش جدید می‌باشد. این ژن در بازوی بلند کروموزوم X (Xq28) قرار دارد.

F8 SegCheck™ Kit v1.2 یک کیت تشخیص مولکولی است که در مدت زمان کوتاهی افراد ناقل و مبتلا به نقص فاکتور انعقادی هشت که معمولاً به عنوان اختلال هموفیلی A شناخته شده است را تشخیص می‌دهد. این کیت اصولاً بر اساس مارکرهای STR و تکنیک QF-PCR عمل می‌کند تا با تحلیل تفکیک و پیوستگی ژنی هاپلوتیپ (بر اساس روش Haplotyping)، ابتلا یا ناقل بودن نمونه جنین را تشخیص دهد.

استفاده از مارکرهای STR، همراه با تشخیص جهش به روش مستقیم، تشخیص پیش از تولد را دقیق‌تر و قابل اطمینان‌تر می‌کند. همراه با تشخیص نقص فاکتور انعقادی VIII، کیت F8 SegCheck™ v1.2 شامل مارکرهای STR اتوزومی است که جهت تشخیص آنیوپلوئیدی کروموزوم‌های ۲۱ ، ۱۸ ، ۱۳ ، X و Y بر اساس روش QF-PCR می‌باشد.

کیت تشخیصی F8 SegCheck™ v1.2 بر اساس ۱۶ مارکر می‌باشد که شامل ۵ مارکر STR با هتروزیگوسیتی بالا در ناحیه بالادست و پایین دست ژن F8 (فاکتور ۸) و ۱۱ مارکر برای غربالگری اولیه اختلالات شایع کروموزومی (۳ مارکر برای کروموزوم ۲۱، ۲ مارکر برای کروموزوم ۱۸ و ۲ مارکر برای کروموزوم ۱۳) و تعیین جنسیت است.

این کیت بر روی نمونه‌‌های DNA تخلیص شده از خون، مایع آمنیون (AF)، نمونه پرز جفتی جنین (CVS) و کارت DBC (کارت نگهدارنده DNA محصول شرکت زیست فناوری کوثر)، بافر لیز کننده خون BLB، بافر لیز کننده سلول های امنیوتیک AFL، و بافر لیز کننده پرز های جفتی CVL قابل استفاده می‌باشد.

مارکر های F8 SegCheck Kit v1.2 کیت تشخیص بیماری هموفیلی A:

DXF8SU6.1، DXF8SU6، DXF8SD1.6، DXF8D8.4، DXF8SD15.9، D21S1809، D21S1414، D21S1442، D21S1411، D18S391، D18S1002، D13S252، DXS7132، D13S634، SRY و AMXY.

سازگاری:
این کیت با سیستم های کپیلاری الکتروفورز ۳ رنگ مانند دستگاه های ABI PRISM 3130/3130xl/3500/3500xL Genetic Analyzer با سایزهای ۳۰، ۵۰ یا ۸۰ سانتی متر کپیلاری سازگار است.