EZy PGD QF-Sexing v1.2

نحوه تشخیص کیت تشخیصی اختلالات کروموزومی EZy PGD QF-Sexing v1.2

در مخلوط پرایمر برای اولین دور PCR، ۲۴ مارکر وجود دارد، بنابراین باید همه چیز با دقت بسیار بالا انجام شود تا بتوان تمام این ۲۴ مارکر را تکثیر کرد. برخی از توصیه‌های لازم در این راهنما ارائه شده است.

باید تأکید کرد که مارکرهای خاص QF-PCR تنها قادر به شناسایی تریزومی‌های سه‌اللی یا مونوزومی‌ها هستند. بنابراین، این روش نمی‌تواند برای شناسایی تریزومی‌های دواللی استفاده شود، زیرا Nested PCR نمی‌تواند این نوع تریزومی‌ها را به‌دقت شناسایی کند (به عنوان مثال، اختلاف ارتفاع پیک‌ها چندان دقیق نیست). با این حال، تنها درصد کوچکی از آنیوپلوئیدی‌ها به دلیل عدم جدا شدن کروموزوم‌ها در تقسیم دوم میوزی (که عامل تریزومی دواللی است) ایجاد می‌شوند. همچنین، مونوزومی کروموزوم X را می‌توان با مقایسه هاپلوتایپ‌های والدین شناسایی کرد. در ازدواج‌های فامیلی، ممکن است هر دو شریک زندگی هاپلوتایپ مشابهی برای کروموزوم X داشته باشند که می‌تواند منجر به به ارث بردن نسخه‌های مشابه کروموزوم X از والدین شود که نمی‌توان آن را از سندرم ترنر (مونوزومی کروموزوم X) متمایز کرد.

در مجموع 20 مارکر برای مرحله اول PCR وجود دارد. این مارکرها شامل 5 مارکر STR برای کروموزوم ۲۱، ۴ مارکر برای کروموزوم ۱۸، 4 مارکر برای کروموزوم ۱۳، 4 مارکر برای کروموزوم X و دو مارکر برای تعیین جنسیت AMXY و Y/X b و همچنین مارکر SE33 برای اصالت نمونه هستند. پنل شکل 6 تقریبا نشان می‌دهد که اگر پرایمرهای مرحله اول برچسب‌گذاری شده و کپیلاری الکتروفورز شوند، هر مارکر در کجا ممکن است دیده شود. با این حال، به دلیل همپوشانی‌ها، باید از تعداد کمتری مارکر در هر تیوب برای مرحله دوم PCR استفاده شود.

دور دوم PCR باید خارج از اتاق پیش از PCR و در یک منطقه جداگانه و مشخص با استفاده از پیپت‌های اختصاصی و نوک‌های فیلتر‌دار انجام شود. استفاده از سرسمپلرهای فیلتر‌دار به‌شدت توصیه می‌شود. استفاده از DNA Zap یا مواد ضد آلودگی در دور دوم PCR یا مرحله دوم PCR حتی ضروری‌تر است.

موارد استفاده

کیت EZy PGD QF-Sexing v1.2 می‌تواند در موارد زیر به کار گرفته شوند:

• تشخیص سندرم داون (تریزومی 21)
• تشخیص سندرم ادوارد (تریزومی 18)
• تشخیص سندرم پاتو (تریزومی 13)
• تشخیص سندرم ترنر (X, 45)
• تشخیص سندرم کلاین فلتر (XXY, 47)
• تشخیص سندرم جاکوب (XYY, 47)
• تشخیص سندرم X سه گانه (XXX, 47)
• دیگر آنیوپلوئیدی‌های مربوط به کروموزوم X و Y
• تشخیص تریپلوئیدی و تتراپلوئیدی
• تعیین جنسیت

ویژگی‌ها

• مجموعه مارکر جامع: شامل مارکرهای اختصاصی بیماری، تعیین جنسیت و تایپ HLA.
• دقت بالا: استفاده از مارکرهای STR برای کاهش اشتباهات.
• قابلیت سفارشی‌سازی: تشخیص آنیوپلوئیدی، جنسیت.
• نحوه عملکرد: استخراج DNA از والدین و استفاده از روش PCR چندگانه برای شناسایی بیماری.

سازگاری

این کیت با سیستم‌های کپیلاری الکتروفورز ۵ رنگ مانند دستگاه‌های ABI PRISM 3130/3130xl/3500/3500xL Genetic Analyzer  با سایزهای ۳۰، ۵۰ یا ۸۰ سانتی‌متر کپیلاری سازگار است.